利用离子交换层析和凝胶过滤层析等方法 , 从日本好(Charybdis japonica)血淋巴中分离纯化出了酚氧化酶 , 并以L-二羟苯丙氨酸(L—DOPA)作为特异性底物对其生化性质和酶性质进行了研究 。 结果表明 , 酚氧化酶和酚氧化酶原的分子质量分别为64.5ku和69.5ku 。 以L—DOPA为底物对酚氧化酶纯品进行研究发现 , 其最适pH值为6.0、最适温度为40℃ 。 对底物L—DOPA和儿茶酚的米氏常数Km值分别为3.41和7.97mmol/L 。 该酶对亚硫酸钠、苯硫脲极为敏感 , 对硫脲、苯甲酸非常敏感 , 表明该酶很可能是一种儿茶酚酶型的酶 。 此外 , EDTA , DETC , Zn^2+ , Mg^2+和Cu^2+均能显著抑制该酶活性 , 且10mmol/L Cu^2+能有效地回复该酶被DETC所抑制的酶活性 , 表明该酶确为一种Cu-金属酶 。 【日本蟳酚氧化酶的分离纯化及其部分生物化学性质研究】完成机构:中国海洋大学生命科学与技术学部海洋生物系,山东青岛266003
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