然而 , 无论氧气多么的重要 , 也不能掩盖它氧化分解摧毁生命分子的本质 。 尤其在细胞主动利用氧的情况下 , 会有生成大量比分子氧更加活泼的自由基 。 在正常情况下 , 细胞利用一系列的酶 , 直接或间接的对抗氧及其自由基所带来的损伤 。 但随着温度的下降 , 虽然破坏的速度也随之下降 , 但因酶的催化才加速的对抗能力 , 现在随着酶的活性剧烈下降 , 而急剧降低 , 本来平衡的化学反应最终倒向了破坏的一方 。 从根本上而言 , 生命作为一种有序结构 , 本来就是一种钢丝上的舞蹈 , 平衡如果崩解 , 生命自然就此终结 。 当然平衡的崩溃速度 , 对不同的生命形式而言 , 差异很大 , 许多植物的种子只需零度左右的低温 , 就可显著延长储存期 , 同时不会受到明显的化学伤害 。 但要长时间储存动物细胞 , 需要低得多的温度 。
至于冰晶伤害 , 和水的性质有关 , 水是一种少见的在结晶固化后 , 体积不减反增的物质 , 这是冰块可以漂浮在水面上的原因 。 而因冰冻暴裂的水管 , 可以让你直观的想象到细胞冻结爆裂的场景 。 除此之外 , 冰晶的刚性结构 , 会将其它物质排斥在外 , 导致尚未冻结的液体中溶质的浓度大幅上升 , 过高的盐浓度以及有害物质可直接损伤细胞 。
通往安全冻结之路
从基本的物理和化学规律 , 可以推导出长时间储存动物细胞 , 通常需要零下120度 , 当然零下196度更好 , 在这样的温度下 , 一切化学进程都几乎完全停滞 , 除非储存时间以地质时间为标尺 , 此时唯一的伤害来自于高能射线的 , 但这通常需要数百年的时间才会具有真正的威胁 。 数十年的研究 , 科学家发现 , 冻结和复苏动物细胞时 , 存在一个明显的危险温区 , 零度到零下60度 , 损伤主要发生在这个温区 。 如何度过这个危险温区安全抵达零下120度 , 就是研究的重点 , 先让我们看看在冻结动物细胞时 , 可能发生的事情 。
细胞的冻结 , 通常是从零下5度开始 , 这是因为细胞内外的液体都是盐溶液 。 当细胞内外的液体进入过冷态后 , 细胞外液率先结冰 , 这些冰基本上由不含盐分的水构成 。 如果降温过快 , 这些冰就可能突破细胞膜进入细胞 , 或者细胞内液也迅速开始结冰 , 这些快速生长的冰晶几乎一定会导致细胞膜发生严重损伤 , 复苏的希望就此终结 。 那么抗寒生物的能力从何而来?答案是甘油类抗冻物质的合成 。
甘油溶液的冰点很低 , 当细胞外液开始结冰后 , 胞内液的温度还在冰点之上 。 而伴随着结冰的过程 , 外液的盐浓度开始上升 , 在渗透作用的影响下 , 细胞开始脱水 , 速度因细胞膜等因素的不同而有所差异 。 细胞体积收缩 , 一方面可以规避胞外的冰晶 , 一方面还可进一步降低胞内的冰点 。 所以 , 这些抗冻生物的细胞在自然环境的低温下 , 大多并没有被真正冰冻 , 这就有效了防止了冰晶的损伤 。 而这些抗冻物质的存在 , 还可防止细胞过度脱水收缩带来的损伤 , 同时使得有害物质的浓度不会上升得太高 , 减缓了可能的化学伤害 。
但要想在数年甚至更长的时间内保存细胞 , 零下数十度的温度是太高了 , 不冻结住胞内的液体 , 化学损伤就无法真正避免 。 而冻结胞内液体的时机选择就是关键中的关键 , 如果一直低速降温 , 那么细胞就可能过度收缩 , 同时高浓度的胞内溶液将直接损伤细胞 。 所以 , 我们需要当细胞收缩恰到好处之时 , 急速降温冻结住胞内液体 。 而目前的研究显示 , 不同的细胞 , 安全冻结的降温以及复苏的过程差异很大 。 这就是为什么 , 直到今天为止 , 器官移植中“浪费”现象非常严重 , 一个器官由太多不同类型的细胞构成 , 要长时间的安全冻存 , 今天的科技还无法做到 。 当然对低温生物学的研究 , 已经大幅度的延长了器官的保存时间 , 比如肾脏 , 从前离体后 , 必须在六小时内移植 , 而现在通过低温抗冻液体灌流术 , 已经可以延长到72小时 , 但这点时间依然太短 。 许多志愿捐献的器官 , 在突发事件发生后 , 根本来不及移植给任何人 , 就彻底的死亡 。 这是不是意味着 , 类似冬眠机这样的东西永远都只能属于科学幻想呢?近年来 , 低温生物学的新发现 , 也许可以帮助我们开辟另一条安全冻结之路 。
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