双缩脲试剂的反应原理是什么？ _双缩

双缩脲试剂的反应原理是什么？

答：双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩物脲反应。
【双缩脲试剂的反应原理是什么？】双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一个碱性的360问答含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。会遇到蛋白质显紫色。
当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与课掉眼祖危多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm 。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml 。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离画除子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。[1]
需要注意的是，能与双缩脲试剂发生紫色反应的化合物扩分子中至少含有两个肽键。因此，二肽无法用它来检验。
一、优点：双缩脲法测定蛋白质测定范围能够是1~10mg蛋白质，操发小亮季鱼命乎无重编春作简单、快捷。既适合手工操作，又适合自动化分析，重复性好、线性关系好，双缩脲试剂可以长期保存（若贮存瓶中有黑色沉淀出灯总宗持鸡亲教坐质现，则需要重新配制）。
二、缺点：灵敏度差，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有：在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。

双缩脲试剂的反应原理是什么？

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