茶多酚的离体抗氧化作用( 三 ) _茶叶技术

用质粒DNA代替基因组DNA来作为抗自由基损伤的检测指标有以下优点：DNA损伤程度检测简单、迅速；细胞内有较强的DNA修复系统，而质粒中没有；细胞中有一系列抗氧化的酶(SOD，CAT，GSH-Px)，有一些代谢中间产物、氧化还原体系而质粒中没有。采用质粒做实验对象，避免了这些因素的干扰。质粒是双链环状DNA，呈超螺旋构象。在质粒提纯过程中，由于机械剪切作用可能出现开环、线型质粒。我们选用的质粒PUC19为超螺旋，开环两种。 60Co γ射线导致质粒DNA辐射损伤主要是由于.OH作用引起的［7］。 100 Gy照射质粒，其超螺旋型质粒百分率明显下降，开环型质粒百分率明显升高，说明自由基导致了DNA单链断裂。而茶多酚抑制了开环型质粒百分率的升高，(P＜0.05或P＜0.01)，说明茶多酚抑制了.OH致质粒DNA的辐射损伤作用。
肝组织GSH水平测定亦可用作检测抗氧化作用。 GSH是谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）作用的必需底物，它可被氧化为氧化型谷胱甘肽。 GSH可用DTNB显色法直接测定［8］。 Vit C/Fe2+是氧自由基发生系统［5］，氧自由基氧化GSH导致GSH耗竭，茶多酚抑制了氧自由基对GSH的氧化作用，说明茶多酚具拮抗氧自由基损伤的作用。
茶多酚是一类多酚类化合物，它具有还原性。本实验证明，茶多酚对离体RBC，DNA或肝匀浆的氧自由基损伤具有显著的抑制作用。
　* 广东省自然科学基金资助
作者单位：蒋建伟　严玉霞　暨南大学医学院生化教研室
岑颖洲　化学系（广州，510632）
何文珊　华南理工大学食品与生物工程学院
参考文献
　1　陈为钧，万圣勤.茶多酚药效研究概况.中草药，1993,24(9):493.
　2　于新蕊，曲军，丛月珠.茶叶的化学成分及药理作用研究进展.中草药，1995,26(4):219.
　3　沈生荣，赵玉芳，杨贤强，等.茶多酚保护生物大分子的自由基机理.浙江农业大学学报，1995,21(4):361.
　4　邹曦露，万谦，李美芬，等.茶多酚对鼠心肌缺血再灌产生氧自由基的清除.波谱学杂志，1995,12(3):237.
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　7　周丽君，方允中，章扬培，等.质粒pBR322的γ辐射损伤效应.辐射研究与辐射工艺学报，1993,11(1):28.
　8　朱大江，褚先秋，都定元，等.充血性心力衰竭肝组织还原型谷胱甘肽与丙二醛变化及超微结构观察.贵州医药，1996,2(3):136.
【茶多酚的离体抗氧化作用】

茶多酚的离体抗氧化作用( 三 )

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