表2表明,微波功率对多糖得率有极显着影响,微波时间和料液比对粗多糖得率均有显着影响,各因素对得率的主次影响顺序是:A(微波功率)>D(料液比)>B(微波时间)>C(水浴浸提温度),各因素的最佳水平组合为AB,c,D,即:微波功率375W,微波时间180s,水浴浸提温度6O℃,料液比1:30 。 采用此条件进行3次验证实验,得到粗多糖的平均得率为2 。 82% 。
2.2茶多糖的抗氧化活性
图1和图2表明,铁观音茶多糖具有较好的清除O2ˉ·和·OH自由基效果,并且随着粗多糖浓度的增加,清除率逐渐增强,即,铁观音茶多糖对O2ˉ·和·OH的清除能力与其浓度具有明显的量效关系,并且微波处理前后,铁观音茶多糖的清除自由基效果并没有显着差异(P>0 。 05) 。 图1中,在低浓度条件下,铁观音茶多糖对邻苯三酚自氧化产生的O2ˉ·抑制作用较弱,但在高浓度条件下具有明显的抑制作用,其对O2ˉ·的半数清除质量浓度IC50约为600ug/ml,而当质量浓度为1000ug/mL时超氧阴离子清除率达到69% 。 图2中,茶多糖浓度较低时,剂量一效应线性关系较好,随浓度增加,·OH清除率增加较快,当浓度增加到一定程度后,对-OH的抑制率增加缓慢,剂量一效应不符合线性关系,其对·OH的半数清除质量浓度IC50约为500ug/mL,在实验浓度范围内,茶多糖对羟自由基的最大清除率为78% 。

图1铁观音茶多糖对02-·的清除效

图2铁观音茶多糖对·OH的清除效
O2ˉ·是生物体内主要的活性氧自由基,也是人体内由氧衍生出来的第一个氧自由基 。 ·OH是已知活性氧中对生物体毒性最强的一种自由基,对细胞内DNA的破坏作用最大,可造成碱基被破坏,从而产生遗传突变 。 近年来关于茶多糖抗氧化作用的报道越来越多,并有人据此解释了茶多糖多种生物学功能的药理学基础,这些报道都表明,茶多糖的抗氧化作用和它的结构有密切关系 。 研究表明,茶多糖是含有10%左右蛋白质的糖蛋白,组成单糖以半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖为主,还有木糖和甘露糖等,其抗氧化作用机制可能是茶多糖中的一些活性位点(如带有酚羟基的氨基酸)捕捉了自由基或与之产生氧化还原反应,或茶多糖大分子将自由基包埋起来使其无法进行氧化反应 。
同时,由于茶多糖结构中存在大量的羟基和羧基,对过渡金属离子具有较强的络合作用,终止了自由基的链式反应,从而对自由基显示出较强的清除作用 。 另外,一般认为,高级结构呈螺旋状的多糖活性较高,而呈可拉伸带状或皱纹型带状的多糖活性一般较低甚至没有活性,三股螺旋构型是多糖最具活性的空间构象,而有报道发现茶多糖在水溶液中以有序的螺旋构象存在,这是否是茶多糖具有抗氧化活性的结构基础,有待进一步深人研究 。
3结论
1)用微波辅助提取铁观音茶多糖,通过四因素三水平正交实验对微波处理条件进行优化,结果表明,影响得率的因素主次顺序是:微波功率>料液比>微波时间>水浴浸提温度;确定最佳的提取工艺条件为:微波功率375W,微波时间180S,水浴浸提温度60℃,料液比1:30 。
2)抗氧化活性结果表明,铁观音茶多糖对O2ˉ·和·OH有较好的清除效果,其清除能力与多糖质量浓度有明显的量效关系,实验范围内的微波处理对其抗氧化活性无显着影响(P>0.05) 。
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