微波辅助提取铁观音茶多糖及其抗氧化活性研究 _微波|提取|抗氧化活性|茶叶文

O引言
茶作为当今世界三大饮料之一越来越受到人们的欢迎。尤其是近年来，人们生活水平逐步提高，对茶饮料的保健功能越来越重视。研究表明，作为茶叶中活性组分之一的茶多糖（TPS），具有抗氧化、抗血栓、降血糖、增强机体免疫能力等多种活性。随着人们对多糖生物学功能的深入认识，从各种天然产物中提取的生物活性多糖的研究成为人们关注的焦点。 20世纪90年代初，日本学者清水岑夫认为茶叶中治疗糖尿病的药理成分为茶叶多糖，此后有关茶叶多糖的研究报道逐年增多。在茶叶加工过程中有大量的枝叶和灰末等副产品未被利用，因此从这些粗老茶叶和茶叶生产的副产品中提取茶多糖作为保健食品的功能因子，则可变废为宝。微波辅助浸提技术是近年发展起来的一种新型物理破壁方法，与传统热水浸提方法相比，具有节能、快速、提取效率高等优点，已被广泛用于植物有效成分的提取，尤其是以极性溶剂为萃取剂的浸提过程，但目前尚未在茶多糖加工中使用。福建是一个产茶大省，尤其以铁观音茶最为出名。本文用微波辅助浸提铁观音茶多糖，采用正交实验优化微波浸提工艺条件，并对微波浸提和常规浸提产品的抗氧化活性进行比较，为今后茶多糖高效大规模的生产，提高茶叶的综合经济效益提供依据。
1材料与方法
1.1实验材料
茶叶，市售安溪铁观音茶叶。
1.2试剂与仪器
三（羟甲基）胺基甲烷，生化试剂，中国医药集团；邻苯三酚、邻二氮菲、盐酸、过氧化氢、硫酸亚铁、无水乙醇及其他试剂，如无特殊说明均为分析纯。 DKZ电热恒温振荡水槽（上海实验仪器厂）；723PC可见分光光度计（上海欣茂仪器有限公司）；BS／BT电子天平（德国赛多利斯股份公司）；RE52AA旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-IIID微波炉（上海亚荣生化仪器厂）；TDL一5离心机（上海安亭科学仪器厂）；pH211台式酸度测定仪（北京哈纳科技有限公司）。
1.3实验方法
1）铁观音茶多糖的提取将烘干的铁观音茶叶粉碎过筛，经乙醚回流脱脂，微波处理一定时间后于60℃热水浸提两次，每次2h，抽滤，合并滤液，减压浓缩，加入5倍体积质量分数95％的乙醇沉淀，低温静置过夜，4000r／min离心，沉淀加蒸馏水溶解，再次重复乙醇沉淀的步骤2次，最后一次得到的沉淀用少量水溶解，活性炭脱色后，Sevag法脱蛋白质4次，浓缩，真空干燥，得到铁观音茶多糖。
2）粗多糖得率的计算多糖含量测定用苯酚一硫酸法。粗多糖得率的计算以1g干品中提取出来的粗多糖占原料总量的百分数表示，计算公式为：粗多糖得率／％=（O.9×多糖质量浓度×提取液体积／原料干重）×100，其中：0.9为葡萄糖的换算系数；多糖质量浓度的单位为ug·mL―1；提取液体积的单位为mL；原料干重的单位为ug 。
3）茶多糖对O2―自由基的清除率0 。 05mol／LTifs-HCI缓冲溶液（pH=8.2）4 。 4mL，25oC预热20min，加人不同浓度的茶多糖溶液0.10mL，再加入25℃预热的2.50mmol／L邻苯三酚0 。 50mL，混匀后于25℃恒温反应4min，然后用10mol／L盐酸终止反应，于320nm处测定吸光值。清除率按下式计算：O2―清除率／％=（1一（A1一A2）／A0）×100，其中：A0一不含茶多糖溶液的吸光值；A1一含有茶多糖溶液的吸光值；A2一含茶多糖但不含邻苯三酚溶液的吸光值。
4）茶多糖对·OH自由基的清除率取0 。 75mmol／L邻二氮菲溶液1mL，PBS溶液2mL和蒸馏水1mL，充分混匀后，加0.75mmol／L硫酸亚铁1mL混匀，加质量分数0.01％的过氧化氢1mL，37℃下保温60min，于536nm处测其吸光值Ap，用质量分数3O％的乙醇1mL代替1mL过氧化氢，测得吸光值Ag 。再用试样1mL代替1mL蒸馏水，测得吸光值As，根据：·OH清除率／％=（As一Ap）／（Ag一Ap）×100计算·OH清除率。

微波辅助提取铁观音茶多糖及其抗氧化活性研究

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