不同盐析法制备蛋白质 _生活知道

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在最适合浸提条件下浸提白灵菇蛋白质，经6000r/min离心20min，合并两次浸提所得的浸提液。分别采取一步盐析法与分步盐析法制备蛋白质，制备方法以下：一步盐析法：向碱性浸提液中一次加入（NH4）2SO4至盐饱和度达90% ， 4℃下静置过夜，6000r/min离心20min，搜集沉淀。用蒸馏水复溶以上沉淀，4℃透析除盐，真空冷冻干燥，分别得一步盐析条件下的粗蛋白质（简写为Y90）。

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分级盐析法：向碱性浸提液中加入（NH4）2SO4顺次至盐饱和度达60%、80%和90% ， 4℃下静置过夜，6000r/min离心20min，顺次搜集沉淀，分别得60%、80%、90%盐饱和度分级盐析粗蛋白质（分别简写为C60、C80、C90）。用蒸馏水复溶以上沉淀，4℃透析除盐，真空冷冻干燥，分别得分步盐析条件下的籽实体与菇脚蛋白质组分。采取考马斯亮蓝法测定蛋白质的析出率。
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不同盐析法制备蛋白质

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